高效液相色谱监测中药的发展现状及前景
中药的成分非常复杂,以往常用的薄层色谱等方法因其精密度、准确度、灵敏度、再现性差而无法符合现代中药的必须。高效液相色谱正是以其平稳、可信、高效的特点沦为中药研究的最重要的分析方法。目前高效液相色谱早已普遍应用于生物碱、皂苷、黄酮、蒽醌、香豆素等各种中药有效成分的测量。近年来对高效液相色谱监测中药的研究十分多,由于高效液相色谱集经典液相色谱和气相色谱的优势于一身,无论柱效、选择性还是分析程度都超过或多达了它们,近年来对高效液相色谱的不足之处展开了改良,使这项技术日臻完善。
1、高效液相色谱发展近况 高效液相色谱在药物分析中的应用于,主要考虑到试样的预处理和分析柱、检测器的自由选择。在试样的预处理上,日前蓬勃发展的固相(微)提取使得许多含量较低的成分获得精制制备,从而适合于高效液相色谱的测量,而孙新国使用逆流萃取测量川芎嗪含量获得了很好的效果。中药中有些紫外吸取很弱,或无特征紫外吸取的成分,必要用高效液相色谱测量,其灵敏度和分离出来度都不尽人意,利用柱前或柱后派生化法可使这些成分较准确地测量出来。
对于极性大、脂溶性劣物质,在YWGCl8柱上容易保有,用十二烷基磺酸钠作为离子对试剂,减少其极性,缩短柱上的保有时间,获得较好的分离出来较籽。将液相色谱和质谱这两个强有力的分析技术在线相连在一起,经过三十年的发展已沦为一项更为成熟期的分析手段,但是它从构成伊始就不存在着问题:从液相色谱流入质谱时,流动相的变化、溶剂的构成、高温高压离子化的问题制约着这种磁共振技术发展,大气压离子化模块具备除去溶剂和离子化的双重功效,它的引进,使得该技术在各个领域获得了普遍的应用于。电喷雾离子源是一种硬电离技术,一般只分解(MH)和(M-H)-两种分子离子峰,选择性监测(mz)190的负分子离子峰,具备较高的灵敏度、准确度、专一性,符合了低浓度药物研究的市场需求。
由张莉等人研究的三维高效液相色谱法可以实时测量葛根素和阿魏酸两种指标。通过实验证明:如果自由选择适合的柱温等色谱条件,乙醇作为反互为高效液相色谱流动互为,分析中药及中成药中有效成分,既安全性又精确。
结构相近的物质,普通的检测器无法检测出来,高效液相色谱-电化学法可以有效地测量黄连粉中仅有劣一个基团的黄芩苷和黄芩素的含量。样品经色谱柱分离出来后搜集,再行经荧光分光光度计测荧光强度,影响因素多,测量简单,改良后的高效液相色谱-荧光法则可以不经派生简化和搜集分离出来物,只经化学处置除杂,稀释后必要进样才可。用该法测定贯叶连翘中金丝桃素的含量也获得了较好的结果。
高效液相色谱-示差折光测黄芪精口服液中黄芪甲苷的含量也都获得了更为失望的结果。对于只有紫外末端吸取,用紫外检测时灵敏度较低,基线不易飘移,示差折光检测其易受外界条件阻碍,冷却衍射检测器能克服以上严重不足,响应值只与样品质量有关,其信号适当与质量成正比,有所不同化合物,质量完全相同则信号适当大致相同。冷却光衍射检测法是基于不溶解样品分子对光的衍射程度与其质量成正比,与其所不含基团性质牵涉到。
只要自由选择必要的检测器参数,之后可使流动相和溶剂几乎气化,不产生信号,而样品中的各个组分以不溶解粒子不存在,对光有衍射,以被检测出来。因此,冷却光衍射检测器可用作不含有所不同基团的多组分同时分离出来、分析。和紫外、荧光等方法比起,冷却光衍射检测法对有所不同物质有近似于完全相同的号召因子, 因而不经常出现低浓度、低号召或高浓度、较低号召的现象,不利于有所不同比例混合物的精确测量.高效液相色谱-冷却光衍射检验法测量银杏叶中萜类内酯含量、红参及育精胶囊中人参 皂苷Rg1和Re的含量和藤黄中藤黄酸含量都获得了很好的结果。
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